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Halo Pull Down(蛋白之間的互作研究)
Halo Pull Down技術是將Halo標簽的融合蛋白固相化到磁珠上,與細胞總蛋白進行孵育,鑒定與之相互作用的蛋白。該方法可以鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白,也可以鑒定兩個已知蛋白間是否存在相互作用。
我們的Halo PullDown技術服務利用無細胞蛋白表達系統來表達Halo標簽的融合蛋白(誘餌蛋白),節省時間,蛋白表達載體構建成功后,不需要轉化和鑒定,可直接表達目的蛋白。 蛋白表達成功后進行純化,將純化后的蛋白與細胞裂解液孵育一段時間后,洗去上清蛋白,將與目的蛋白結合的蛋白洗脫,并進行質譜檢測。
技術流程
載體構建 | 客戶提供目的蛋白對應的CDS的序列或質粒, | 測序結果 | 1-2周 |
克隆至合適的表達載體, | |||
質粒測序, | |||
質粒制備。 | |||
無細胞表達+純化 | 用小麥芽胚蛋白表達體系進行蛋白表達, | 表達評估報告 | 1周 |
蛋白表達評估 (Western Blot) 。 | |||
Pull Down | 細胞裂解, | 銀染結果 | 1周 |
目的蛋白和總蛋白孵育, | |||
洗脫與目的蛋白結合的蛋白。 | |||
質譜檢測 | 將洗脫的蛋白進行質譜鑒定。 | 質譜結果 | 2周 |
客戶提供材料 | 交付結果 |
新鮮樣本(組織或者細胞):細胞數量>2.7ⅹ107; 組織樣本>3g | 載體測序結果 實驗過程圖 質譜結果 |
我們可為您提供Halo Pull Down(蛋白之間的互作研究)技術服務,歡迎咨詢!
更多技術服務:
DNA親和純化測序(DAP-seq)
在全基因組水平上鑒定轉錄因子的結合位點,預測轉錄因子潛在的靶基因。
DAP-seq 技術的出現,使轉錄因子結合位點的研究不再局限于生物物種,不再受抗體質量的限制,進一步拓展并加深了生命科學領域研究的廣度和深度。
DAP-seq與RNA-seq聯合分析
分析轉錄因子的靶基因在RNA-seq數據中的表達變化,深入挖掘DAP-seq和RNA-seq測序數據,增加轉錄組測序的分析深度。
酵母單雜交技術 (Yeast One-Hybrid)
確定已知 DNA 和蛋白質之間是否存在相互作用。
篩選結合于目標順式作用元件或其他短 DNA 序列的新蛋白。
鑒定蛋白結合 DNA 的結構域,精準定位與DNA 結合的蛋白序列。
重組蛋白表達
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